循环miRNAs作为分子标记物在食管鳞癌诊断和预后中的研究

需要解决的问题：

1) 寻找miR-196基因及miR-146基因的致病性SNPs，探讨其与食管鳞癌发生及预后的关联。利用血浆中循环miR-196a及miR-146表达的变化，筛选出与食管鳞癌发生与预后的可能的肿瘤标志物。

2) 阐明miR-196基因及miR-146基因的致病性SNPs调控miR表达水平的分子机制。 

计划达到的目标：

1）分析miR-196a基因及miR-146a基因的多个候选SNPs位点与食管鳞癌遗传易感性及预后的关系，并分析不同基因型的miR表达情况；

2）预实验已知miR-196a基因及miR-146a基因在食管鳞癌组织中异常表达，进一步大样本检测其在食管鳞癌组织及癌旁正常组织的表达情况；

3）分析循环miR-196a及miR-146a在食管鳞癌患者及健康对照样本中的表达差异，寻找食管癌早期诊断的分子标志物；

4）分析miR-196a及miR-146a在血浆和组织中表达的相关性及差异，以确定循环miR是否可以代表组织标本中miR的表达水平；

5）分析循环miR-196a及miR-146a的表达与食管鳞癌预后的关系，寻找食管鳞癌预后的分子标记物。 

        食管癌的早期发现是延长患者生存时间和提高生存质量的关键。但目前食管癌发病机制不清，患者就诊时多趋晚期。近年来的研究表明，多种特异性miRNAs在食管癌中异常表达，但由于组织标本采集困难，很难用于早期诊断的检测。而出现在血清、血浆等无细胞体液中的循环miRNAs，具有在血清或血浆中稳定表达、取样创伤微小（或无创）等特性，可作为肿瘤初期筛查或诊断后的分子标志物，用以辅助证实早期诊断的可靠性。我们的前期研究发现⑴miR-196a-2基因rs11614913和rs35010275多态与≤60岁年龄组人群ESCC的发病风险相关；⑵miR-196a及miR-146a基因在食管癌组织中表达上调。本研究拟⑴进一步分析候选SNPs对食管癌遗传易感性和预后的关系；⑵进一步大样本检测食管癌组织标本中miR-196a和miR-146a的表达；⑶检测食管癌患者血浆中循环miR-196a和miR-146a的含量，分析其与组织表达的一致性；⑷收集食管癌患者的生存及预后资料，分析循环miR-196a和miR-146a的表达与食管癌预后的关系，为寻找敏感而特异性的分子标志物提供理论依据和实验基础。